7月23日晚间，湖北日报发布一则新闻，其中提到，“22日深夜，武汉大学人民医院生殖医学中心负责人谢青贞教授接到来自河南郑大一附院生殖医学中心的紧急求助。原来，因河南遭遇超强降雨，郑州及周边发生严重内涝，郑大一附院河医院区内涝严重一度被迫停诊。其中该院生殖医学中心前期为接受试管婴儿治疗的患者冷冻的数万个胚胎，
因缺乏供应冷冻液——-196℃液氮，导致这些承载着诸多不孕不育家庭希望的胚胎，岌岌可危。”
这篇报道在较短时间内被多家媒体转载，引起了不小的关注，但对于非生殖领域专业人士而言，这个话题相对比较陌生。本文试图
从专业角度还原一下人类胚胎冷冻保存的方方面面。
为方便理解后面的内容，我们可以先了解一些
基本概念。
试管婴儿
：
是体外受精－胚胎移植技术的俗称，是指采用人工方法让卵细胞和精子在体外受精，并进行早期胚胎发育，然后移植到母体子宫内发育而诞生的婴儿。
液氮
：
即液态的氮气。液氮是一种低温液体，通过分馏法工业生产。它的主要特点是
能够保持-196°C的超低温度，这使得它具有多种用途。其中之一是，在辅助生殖技术过程中用于
保存配子和胚胎，以治疗人类不育症和解决生育力保存问题，以及在养牛业中保存动物配子和胚胎。
胚胎冷冻
：
上海哪儿能做供卵试管是通过特殊的保护措施和降温程序将胚胎放在超低温环境中，而复温后又恢复代谢能力，从而达到维持胚胎原有生物学活性、长期保存胚胎目的的一种保存技术。目前，最常用的超低温环境为液氮，其保存温度为-196℃。
胚胎解冻/复苏
：
和胚胎冷冻相反，胚胎解冻/复苏是将胚胎从超低温状态下恢复至正常生理状态的过程。解冻方法需与上述冷冻方法相对应，这样更有利于胚胎的复苏及生理功能的恢复，不恰当的复苏方式会对胚胎造成较大损伤。
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一、 液氮冻存 技术概况
根据低温保存过程中介质与液氮之间的直接接触情况，
液氮冻存技术可分为“开放式”和“封闭式”两种。顾名思义，
在封闭系统中，样品在整个冷却、储存和回温复苏过程中与液氮分离。相反，开放式系统可以使样品与液氮直接接触。
封闭式系统的倡导者强调通过液氮传播疾病的潜在危险，并推崇其方法的安全性；使用开放式系统的人则认为缺乏疾病通过液氮传播的证据，并认为该系统更加一致和有效。
其实，
目前两种方式都显示了不同程度的生物安全问题。鉴于不同来源的液氮有时可能含有感染成分，开放式系统提示可能存在感染和疾病传播的机会。然而，目前还没有液氮传播疾病的报道，据估计，迄今为止已经有60-100万使用开放式系统的玻璃化冷冻（
详见后文介绍
）胚胎得到了移植。
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先看
程序化慢速冷冻的定义，它是指将胚胎采用低浓度的冷冻保护剂梯度脱水，经程序冷冻仪缓慢降温。整个冷冻过程时间较长，包括将胚胎依次放入浓度梯度增加的冷冻保护剂中逐步脱水，置入程序冷冻仪快速降温至-7℃ 植冰，人工诱导冰晶形成，然后缓慢降温至-35℃～-80℃后投入液氮中保存。
慢速冷冻法采用浓度较低、渗透较慢的冷冻保护剂，如丙二醇、甘油等，对胚胎毒性较小，但降温速度慢，
冷冻过程所需时间长，而且需要购买专用的程序降温装置，价格昂贵，操作繁琐，目前国内外均较少使用。
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由于
玻璃化冷冻简便、快速、有效等特点，且不需要借助冷冻仪器，目前已经替代前者成为胚胎冻存中最常用的方法。
三、液氮供应在冻胚保存过程中的重要性
为了胚胎等样本的安全保存，必须保证超低温状态的维持和液氮的持续供应
。液氮供应故障可能因各种原因出现，例如，如果受压容器的真空破裂或其内容物释放、自动冰箱过载、液氮供应公司发货失败以及其它突发事故造成的液氮供应短缺等。生殖中心必须确保，如果氮供应因任何原因出现故障，有相应的安全技术或措施可以应对。
应对方式包括：在某些地方实施应急措施，例如
增加氮气输送容器的供应，制定适当的书面计划，并对所有适用人员进行培训，以处理供应不足的情况；
预测可能出现的运输问题，如严重交通拥堵、事故以及其它意外事件，并在轻压容器中保留剩余容量或保留外部大容量容器等。
像本文开篇所提到的新闻报道，就属于因极端暴雨的突发导致液氮供应不足，从而引发冷冻胚胎保存出现危险的事件。郑大一附院生殖医学中心在全国范围内属于顶级生殖医疗机构，其各项硬件措施、管理和质控措施也处于很高水平，但因为这一次突发事件也面临了极大考验，这
对于国内其他生殖中心在冻胚保存的应急管理方面也有较大的预警作用。
四、胚胎到底可以冷冻保存多长时间？
关于冻胚的存储时限，理论上，在稳定的液氮环境中，胚胎可以永久保存，冷冻保存时间长短不会影响胚胎发育潜能。
目前世界上有关“冷冻胚胎时间最长，并在解冻后获得活产”的案例报道是27年。部分临床数据证明，5年以内的冷冻胚胎，胚胎复苏后的存活率、试管妊娠成功几率以及出生缺陷率不会有负面影响。
2020年6月，上海交大附属第九人民医院辅助生殖科
匡延平团队在《
Human Repruduction》上发表一项重要研究成果，该研究纳入了24,698名进行首次移植的女性患者。结果表明，
玻璃化冷冻胚胎保存时间的延长对后续妊娠结局有负面影响，包括生化妊娠率、临床妊娠率和活产率，但对新生儿的预后没有影响。
具体如
下图所示，第一到第四组分别是指玻璃化冷冻保存时长分别：小于3个月、3-6个月、6-12个月以及12-24个月。这一大数据研究结果提示，
冻存胚胎还是尽早移植更好。
图片针对冷冻移植，已经有不少的高质量RCT结果可供参考，其中特
别有代表性的是
中科院院士陈子江团队的研究成果，以下是部分研究结果展示：
希望通过这篇软文的介绍，能帮助大家全面了解人类胚胎冷冻相关的各种“神秘”问题，同时也希望这次郑大一附院生殖医学中心因暴雨事件遇到紧急情况的胚胎都平安无事，祝福有需求的准父母都能好“孕”相随。
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参考资料：
1. 王珊珊, 孙海翔. 胚胎的冷冻与复苏[J]. 实用妇产科杂志, 2016, 32(004):247-248.
2. Vajta G, Rienzi L, Ubaldi FM. Open versus closed systems for vitrification of humanoocytes and embryos. Reprod Biomed Online. 2015 Apr;30(4):325-33. doi:10.1016/j.rbmo.2014.12.012.
3. Al-Ibraheemi A, et al. Serious Impact of Deficiency of Liquid Nitrogen in CryogenicContainers and Quality Control for Preservation of Gametes and Embryos. 2021. JFertil In vitro IVF WorldwReprod Med Genet Stem Cell Biol 9:234.
4. Li J, et al. The effect of storage time after vitrification on pregnancy andneonatal outcomes among 24 698 patients following the first embryo transfercycles. Hum Reprod. 2020 Jul 1;35(7):1675-1684. doi: 10.1093/humrep/deaa136.
5. Chen ZJ, et al. Fresh versus Frozen Embryos for Infertility in the Polycystic OvarySyndrome. N Engl J Med. 2016 Aug 11;375(6):523-33. doi: 10.1056/NEJMoa1513873.
6. Wei D, et al. Frozen versus fresh single blastocyst transfer inovulatory women: a multicentre, randomised controlled trial. Lancet. 2019 Mar30;393(10178):1310-1318. doi: 10.1016/S0140-6736(18)32843-5.
多吃鱼虾,蛋类等高蛋白的食物,多吃新鲜蔬菜水果, 不要螃蟹
饮食易消化避免辛辣刺激的,胚胎移植后第14天可以通过验晨尿确定是否妊娠 .
1 饮食宜清淡为主，计量不要食用太过于油腻和辛辣的食物，因为在此期间，促排药物的使用，运动量也会随之相对以前减少，所以食道蠕动减缓，造成女性患者试管期间容易出现食欲不振，消化不良等现象，所以饮食清淡的食物有理由身体健康。此外，辛辣食物容易导致腹泻，从而降低免疫力，影响身体健康，降低做试管期间的成功率。
2 不要吃过敏的食物。如果是过敏体质，或者对某些东西过敏，应远离过敏源，不要吃会一起过敏的食物。
3 可以食用含有高蛋白的食物。促排及取卵期间可能会引起卵巢过度刺激，女性可能会出现腹胀，腹痛等不良反应。使用一些高蛋白饮食，例如鱼，瘦肉，鸡肉，深海虾（不过敏的情况下），缓解卵巢过度刺激症状。
4 可以食用含有丰富维生素E的水果，如橙子，葡萄，提子，苹果等。
5 忌寒性食物，如螃蟹等。
6 做试管婴儿患者B超当日或者前一晚精良不要食用豆制品，如豆浆等。因为此类食物容易导致胀气，这样会干扰医生的视线。
